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洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败.ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的.通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质.聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来.可以说在ELISA操作中，洗涤是**主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格按要求洗涤，不得马虎人绒毛膜促性腺**β进口ELISA试剂盒报价欢迎致电北京方程生物获取相关资料。
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人绒毛膜促性腺**β进口ELISA试剂盒报价封闭是否必要，取决于ELISA的模式及具体的实验条件.并非所有的ELISA固相均需封闭，封闭不当反而会使阴性本底增高.一般说来，双抗体夹心法，只要酶标记物是高活性的，操作时洗涤**，不经封闭也可得到满意的结果.特别是用单抗腹水直接包被时，因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面，业已起到了类似封闭剂的作用.但在间接法测定中，封闭一般是不可少的（见2.2.2）.包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中，在低温可保存数月.
3.2.3 结合物的制备 酶标记抗体的制备方法主要有两种，即戊二醛交联法和过碘酸盐氧化法. （1）戊二醛交联法：戊二醛是一种双功能团试剂，它可以使酶与蛋白质的氨基通过它而联结.碱性磷酸一般用此法进行标记.交联方法一步法、两步法两种.在一步法中戊二醛直接加入酶与抗体的混合物中，反应后即得酶标记抗体. ELISA中常用的酶一般都用此法交联.它具有操作简便、有效（结合率达60%-70%）和重复性好等优点.缺点是交联反应是随机的，酶与抗体交联时分子间的比例不严格，结合物的大小也不均一，酶与酶，抗体与抗体之间也有可能交联，影响效果.诹讲椒ㄖ校?br> 先将酶与戊二醛作用，透析除去多余的戊二醛后，再与抗体作用而形成酶标抗体.也可先将抗体与戊二醛作用，再与酶联结.两步法的产物中绝大部分的酶与蛋白质是以1:1的比例结合的，较一步法的酶结合物更有助于本底的改善以提高敏感度，但其偶联的有效率较一步法低.
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温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃（冰箱温度）等.37℃是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的合适温度.在建立ELISA方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时，产物的生成可达顶峰.为加速反应，可提高反应的温度，有些试验在43℃进行，但不宜采用更高的温度.抗原抗体反应4℃更为**，在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过 ye，以形成**多的沉淀.但因所需时间太长，在ELISA中一般不予采用
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